Tes silang: untuk apa mereka, teknik dan dasar, fase

Tes silang adalah serangkaian studi laboratorium yang dilakukan untuk menentukan apakah produk darah dari donor (terutama darah lengkap dan konsentrat globular) kompatibel dengan darah penerima.

Ini adalah tes pelengkap selain kompatibilitas ABO dan faktor Rh. Alasan untuk tes silang adalah bahwa kadang-kadang dua individu (penerima donor) mungkin memiliki kelompok ABO dan Rh yang sama tetapi darah mereka masih tidak kompatibel.

Ketidakcocokan tersebut disebabkan oleh adanya antibodi terhadap serangkaian protein sel darah merah yang dikenal sebagai antigen minor. Antigen ini tidak dievaluasi secara rutin seperti yang dilakukan dengan golongan darah (ABO) dan faktor Rh.

Ini karena antigen minor jauh lebih jarang dan memiliki ekspresi variabel pada setiap individu, oleh karena itu hampir tidak mungkin untuk mengelompokkan mereka dalam kategori seperti yang dilakukan dengan kelompok dan faktor Rh.

Sebagai gantinya, sel darah merah donor dicampur dengan serum pasien (uji kompatibilitas utama) dan sel darah merah pasien dengan serum donor (uji kompatibilitas kecil) untuk mendeteksi keberadaan reaksi antigen-antibodi.

Ketika ada antibodi terhadap antigen minor, baik dalam serum pasien atau donor, tes dikatakan positif, sehingga dalam kebanyakan kasus unit darah tertentu tidak dapat ditransfusikan.

Grup ABO

Untuk memahami dengan baik bahwa reaksi silang diperlakukan pertama kali, perlu diketahui dasar-dasar tentang golongan darah.

Dalam hal ini yang paling penting adalah mengetahui bahwa darah dapat diklasifikasikan ke dalam empat kelompok: A, B, AB dan O.

Masing-masing kelompok ini mengekspresikan pada permukaan sel darah merah protein tertentu (antigen), yang diidentifikasi sebagai unsur asing oleh antibodi dari reseptor potensial dari kelompok yang berbeda.

Yang paling mencolok dari reaksi antigen-antibodi dalam kompatibilitas darah adalah bahwa tidak ada paparan antigen sebelumnya diperlukan untuk antibodi ada. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antibodi alami

Secara umum, agar antibodi ada dalam tubuh individu, perlu bahwa sel darah putih sebelumnya telah terpapar ke antigen.

Ini berarti bahwa pada kontak pertama antara antigen asing dan organisme tidak ada antibodi, karena ini dihasilkan kemudian, setelah kontak awal. Oleh karena itu, tidak mungkin bagi sistem kekebalan untuk memiliki antibodi terhadap misalnya virus tertentu, jika belum pernah terpapar di masa lalu.

Satu-satunya pengecualian di atas adalah antigen anti AB. Dalam kasus ini, orang tersebut memiliki antibodi terhadap antigen yang tidak dimiliki sel darah merahnya meskipun mereka tidak pernah bersentuhan dengan sel darah merah orang lain. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antigen dan antibodi terkait dengan golongan darah

Golongan darah ditentukan dalam kasus sistem ABO dengan adanya antigen spesifik (A atau B) dalam membran sel darah merah dan, sebaliknya, antibodi terhadap antigen yang tidak ada dalam membran eritrosit.

Dengan demikian, seseorang dengan golongan darah A mengekspresikan antigen A pada permukaan sel darah merahnya, sedangkan di dalam serum terdapat antibodi anti-B.

Sebaliknya, pada pasien kelompok B, antigen B ditemukan, sedangkan antibodi adalah anti-A.

Sekarang, pasien dengan darah AB memiliki antigen A dan B. Oleh karena itu, tidak ada antibodi, karena hal itu akan menghancurkan sel darah merah orang tersebut.

Kebalikannya terjadi pada kelompok O, di mana membran eritrosit tidak menunjukkan salah satu dari dua antigen (baik A maupun B), sedangkan dalam serum terdapat antibodi anti-A dan anti-B.

Ketidakcocokan grup ABO

Dari penjelasan di atas, kompatibilitas golongan darah ABO dapat dengan mudah dideduksi, karena antigen membran eritrosit secara otomatis dikenal sebagai antibodi dalam serum. Jadi:

- Darah A kompatibel dengan grup A dan grup O.

- Golongan darah B kompatibel dengan golongan darah B dan O.

- Orang-orang dengan golongan O hanya dapat menerima darah O (karena mereka memiliki antibodi anti-A dan anti-B), walaupun darah mereka diterima oleh semua kelompok lain tanpa masalah karena kekurangan antigen.

- Akhirnya. Mereka yang memiliki golongan darah AB dapat menerima darah dari semua kelompok lain (A, B, O dan tentu saja AB), karena mereka tidak memiliki antibodi terhadap antigen apa pun. Namun, hanya orang AB yang dapat menerima darah AB, karena semua kelompok lain memiliki antibodi yang akan menghancurkan sel-sel darah merah ini.

Antigen minor

Seperti halnya kelompok ABO, serangkaian protein yang berfungsi sebagai antigen dapat ditemukan di permukaan eritrosit, seperti halnya dengan antigen dari kelompok ABO.

Namun, antigen ini tidak terjadi pada semua individu. Kombinasinya heterogen dan penetrasi (tingkat ekspresi protein) bervariasi, oleh karena itu tidak mungkin untuk diklasifikasikan dalam kelompok-kelompok seperti yang ada untuk ABO dan Rh. Dari sana, namanya berasal dari "antigen minor", juga dikenal sebagai "antigen insiden rendah".

Meskipun tidak sering, mungkin ada antibodi alami terhadap antigen minor. Di antara mereka yang paling umum adalah Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb dan Kidd. Semuanya bertanggung jawab atas reaksi hemolitik dan pasca transfusi yang sangat serius.

Selain itu, mungkin ada kasus sensitisasi terhadap antigen minor melalui kontak sebelumnya, baik dengan protein antigenik tersebut karena transfusi sebelumnya atau karena imunitas silang.

Kekebalan silang

Dikatakan bahwa ada kekebalan silang ketika dua antigen dari dua sumber berbeda (misalnya sel darah merah dan bakteri) sangat mirip, sampai pada titik bahwa antibodi terhadap salah satu protein antigenik tersebut juga bereaksi dengan yang lain karena mereka hampir identik. .

Untuk memahaminya dengan lebih baik, ambil contoh hipotetis sebelumnya (antigen sel darah merah dan bakteri). Dalam kedua kasus tersebut tidak ada antibodi alami, tetapi jika seseorang terpapar bakteri, mereka akan menghasilkan antibodi terhadapnya.

Antibodi seperti itu akan bereaksi kemudian terhadap sel darah merah jika antigen yang satu ini sangat mirip dengan bakteri yang menginduksi pembentukan antibodi.

Jika ini terjadi, sel-sel darah merah dengan protein antigenik tertentu tidak dapat diberikan kepada orang yang memiliki antibodi, karena akan ada penolakan. Di sinilah letak pentingnya reaksi silang.

Untuk apa tes silang itu?

Karena tidak mungkin untuk mengkarakterisasi darah individu yang berbeda dalam kelompok berdasarkan antigen minor, satu-satunya cara untuk mengetahui apakah dalam darah seseorang terdapat antibodi terhadap antigen minor sel darah merah orang lain adalah melalui uji silang. .

Dalam kasus-kasus di mana antibodi hadir, reaksi hemolisis atau aglutinasi dipicu, sehingga disimpulkan bahwa reaksi tersebut positif; yaitu, ada antibodi terhadap antigen minor (walaupun tidak diketahui persis apa). Kalau tidak, tesnya negatif.

Yayasan

Tes silang didasarkan pada reaksi antigen-antibodi. Oleh karena itu, dengan mereka dimungkinkan untuk mendeteksi jika dalam serum reseptor terdapat antibodi terhadap antigen sel darah merah donor (atau sebaliknya) yang memicu reaksi antigen-antibodi.

Jika tidak ada antibodi, tidak ada reaksi yang terjadi dan tes dilaporkan negatif. Sebaliknya, jika reaksinya positif (ada hemolisis atau aglutinasi selama tes) dapat disimpulkan bahwa antibodi hadir.

Dalam hal ini, penting untuk dicatat bahwa mungkin ada antibodi terhadap sel darah merah baik pada donor maupun serum penerima. Ini adalah alasan bahwa ada dua jenis reaksi silang.

Jenis reaksi silang

Ada kemungkinan bahwa ada antibodi terhadap eritrosit donor dalam serum pasien; tetapi kebalikannya mungkin juga benar, yaitu, antibodi dalam serum donor terhadap sel darah merah pasien.

Itulah sebabnya ada dua jenis uji silang:

- Tes silang yang lebih besar.

- Uji silang minor.

Kedua jenis dilakukan secara rutin di bank darah sebelum mentransfusikan produk darah, mengingat bahwa jika salah satu tes positif, ada risiko tinggi reaksi transfusi yang dapat membahayakan kehidupan pasien.

Tes silang yang lebih besar

Dalam tes ini, dievaluasi apakah ada antibodi terhadap sel darah merah donor dalam serum penerima.

Jika ini terjadi, produk-produk darah tidak dapat diberikan, karena sejumlah besar anti-bodi hadir dalam plasma pasien akan dengan sangat cepat menghancurkan sel-sel darah merah donor, menghasilkan reaksi bencana dalam tubuh penerima dalam proses. Reaksi ini sangat parah sehingga dapat mengancam hidup Anda.

Uji silang minor

Dalam hal ini, ditentukan apakah ada antibodi dalam serum donor terhadap sel darah merah penerima.

Jika demikian, antibodi akan mulai menghancurkan eritrosit reseptor. Namun, karena jumlah antibodi terbatas, reaksinya kurang intensitas; meski masih berbahaya.

Fase

Baik uji silang mayor dan minor dibagi menjadi tiga fase:

- Salina.

- Thermal atau inkubasi.

- Coombs.

Pada fase pertama, sel darah merah dan serum dicampur dalam saline. Setelah itu, albumin ditambahkan, dan sampel diinkubasi pada 37º C selama 30 menit untuk akhirnya melanjutkan dengan fase coombs.

Teknik

Teknik pengujian silang relatif sederhana, karena melibatkan penambahan sel darah merah donor ke serum pasien (uji silang mayor) serta eritrosit penerima ke serum donor (uji silang minor).

Untuk memicu reaksi antigen-antibodi dalam waktu yang relatif singkat, serangkaian langkah standar harus diikuti. Langkah-langkah ini diringkas dengan cara yang disederhanakan di bawah ini.

Penting untuk diingat bahwa pada bagian berikut, tes kompatibilitas yang lebih baik dijelaskan, meskipun langkah-langkahnya sama untuk tes kompatibilitas kecil, tetapi bertukar asal sel darah merah dan serum.