Minyak imersi: komposisi, karakteristik, pondasi dan penggunaan

Minyak imersi adalah cairan kental dan transparan yang memiliki indeks bias tinggi. Untuk alasan ini, ini banyak digunakan dalam pengamatan mikroskopis, karena memberikan sifat pemekatan cahaya ketika melewati tujuan 100X mikroskop, meningkatkan daya penyelesaiannya.

Hal ini terjadi karena pembentukan film kental antara target dan noda, mencegah sinar cahaya menyebar ketika mereka mencapai udara, memusatkan sinar cahaya ke arah sampel.

Minyak imersi hanya digunakan dengan tujuan 100X. Itulah sebabnya tujuan 100X juga disebut sebagai tujuan pencelupan. Sisanya dikenal sebagai target kering. Tujuan ini tidak dapat digunakan tanpa minyak imersi, karena tanpa itu visualisasi tidak akan memuaskan.

Fungsi utama dari minyak imersi adalah untuk memberikan gambar yang lebih jelas, lebih tajam dan lebih jelas, memungkinkan pengamatan detail yang tidak mungkin dilakukan dengan tujuan lain.

Oli pertama yang digunakan untuk tujuan ini adalah minyak adas manis, digunakan bersama dengan lensa imersi pertama yang dibuat oleh Giovanni Battista Amici. Ini hanya menghindari aberasi kromatik, tetapi tidak meningkatkan bukaan numerik sistem lensa.

Kemudian minyak cedar digunakan, tetapi minyak itu menyajikan banyak kerugian yang memaksa pemakaiannya. Di antara mereka adalah keasamannya yang tinggi, yang merusak tujuan dalam jangka pendek.

Selanjutnya, zat lain seperti air dan gliserin digunakan sampai minyak imersi sintetik dibuat, yang secara bertahap disempurnakan sampai mencapai minyak imersi saat ini, yang merupakan senyawa kompleks dari zat organik.

Komposisi minyak imersi

Minyak imersi terdiri dari campuran senyawa organik seperti: terphenyl, terphenyl terhidrogenasi, hidrokarbon alami dan polibuten.

Karakteristik minyak imersi

Minyak imersi adalah cairan kuning muda, penampilan sedikit kental, dengan bau dan kerapatan khas antara 0, 92 hingga 0, 99 g / cm3.

Minyak imersi tidak larut dalam air, dan memiliki titik didih 340 ° C. Indeks bias a (n 20 ° C / D): berkisar antara 1, 482 - 1, 516. Dalam sebanyak itu, indeks peradangan adalah 110 ° C dan viskositasnya berosilasi antara 100 hingga 120 mPa.s.

Produk ini harus dibuang dengan benar, karena bersifat ekotoksik. Artinya, itu berbahaya bagi lingkungan, terutama yang menyerang hewan air. Di sisi lain, itu mengiritasi kulit dan selaput lendir. Jika tertelan, itu nefrotoksik dan kardiotoksik.

Minyak imersi stabil pada 15 hingga 25 ° C, suhu di mana ia harus disimpan.

Dasar-dasar minyak imersi

Saat menggunakan lensa pembesaran yang lebih tinggi, intensitas cahaya harus ditingkatkan. Namun, banyak sinar cahaya hilang karena tersebar ketika mencapai udara (ruang antara kaca penutup dan lensa), dan bahkan beberapa sinar mengalami pantulan total.

Minyak imersi memiliki indeks bias yang mirip dengan kaca. Karena itu, ketika oli dihubungi antara lensa 100X dan kaca penutup, berkas cahaya terkonsentrasi.

Sinar terkonsentrasi melintasi sampel dan meningkatkan ketajaman gambar, yaitu, meningkatkan bukaan numerik dari tujuan dan memperbaiki penyimpangan kromatik dan bola.

Penggunaan atau aplikasi

Penggunaan minyak imersi sangat diperlukan ketika perlu untuk mengamati gambar dengan cara yang lebih luas, menggunakan tujuan pembesaran yang lebih besar (tujuan 100X) dan dengan demikian dapat melihat detail yang penting untuk menegakkan diagnosis.

Oleh karena itu, banyak digunakan dalam studi mikroskopis dari berbagai bidang seperti: histologi, sitologi, hematologi dan bakteriologi. Misalnya, berguna untuk mempelajari karakteristik sel dan jaringan pasien.

Ini juga berfungsi untuk analisis apusan darah, di mana kami ingin memerinci karakteristik hemoparasit di dalam dan di luar eritrosit, serta dalam persiapan Gram, untuk menentukan karakteristik morfotintorial mikroorganisme.

Ini biasanya digunakan dalam persiapan tetap, karena tidak dianjurkan dalam persiapan segar. Ini karena tegangan permukaan oli menyebabkan kaca penutup bergerak, yang menyebabkan sampel bergerak selama pengamatan dan mencegah analisisnya.

Di sisi lain, minyak imersi tidak hanya berguna dalam mikroskop optik konvensional: ia juga digunakan dalam total mikroskop refleksi fluoresensi internal (TIRFM) dan dalam aplikasi fluoresensi confocal.

Langkah-langkah untuk mengamati persiapan menggunakan minyak imersi

Untuk melihat persiapan mikroskop, pertama-tama fokus pada persiapan dengan tujuan pembesaran yang lebih rendah, biasanya 10X, dengan intensitas cahaya rendah.

Kemudian tujuan 40X dilewatkan, dan bagian cahaya sedikit meningkat. Beberapa analisis dapat dilakukan dengan peningkatan ini, tetapi untuk melihat detail struktural Anda memerlukan pembesaran 100X.

Sebelum pergi ke tujuan 100X, setetes minyak imersi ditempatkan pada kaca penutup, tepat di mana Anda ingin mengamatinya, dan kemudian revolver mikroskop bergerak untuk menemukan tujuan 100x dalam persiapan.

Intensitas cahaya diatur (meningkat) (menggerakkan kondensor dan membuka diafragma). Kemudian, dengan beberapa gerakan kecil yang diberikan ke sekrup mikrometer (maju atau mundur) harus fokus dengan sempurna jika mikroskop menggunakan tujuan parafocal.

Jika Anda mencoba memfokuskan persiapan secara langsung dengan tujuan perendaman, mungkin ada masalah dalam menemukan fokus. Ini bukan tindakan yang mustahil, tetapi kesulitannya meningkat secara signifikan.

Peduli

Untuk menggunakan minyak imersi, kondisi tertentu harus diperhitungkan.

Ketika preparasi berwarna telah dibuat, seperti apusan yang diwarnai dengan Giemsa atau Gram, perlu menunggu apusan mengering sepenuhnya sebelum menempatkan minyak imersi. Jika tidak, minyak bersama dengan air akan membentuk misel yang tidak akan memungkinkan persiapan divisualisasikan.

Di sisi lain, setelah mengamati kumpulan persiapan, yaitu, pada akhir hari kerja, tujuan 100X harus dibersihkan dengan hati-hati, menggunakan kertas untuk lensa etanol. Jika lensa dibiarkan kotor, minyak akan mengering di atasnya dan kemudian akan sangat sulit untuk menghapusnya, merusak bidang tampilan.

Demikian juga, harus diperhitungkan bahwa minyak mudah terbakar dan harus dijauhkan dari sumber panas (korek api). Penting untuk menghindari memanaskannya di atas 65 ° C.

Akhirnya, minyak adalah produk beracun. Karena itu, kontak langsung dengan kulit dan selaput lendir harus dihindari, karena dapat menyebabkan iritasi ringan. Untuk menghindari kecelakaan, penggunaan sarung tangan dan kacamata pengaman disarankan untuk memanipulasinya.

Jika terjadi kontak dengan minyak, area tersebut harus dicuci dengan banyak air. Jika minyak terciprat ke mata, harus dicuci dengan cara yang sama, menjaga mata tetap terbuka. Dalam kasus tertelan secara tidak sengaja, penting untuk minum air hangat dan menyebabkan muntah, selain pergi ke dokter terdekat.